製品無償保証 成功サポートキャンペーン中!(5/31まで)
・操作上の問題が生じて、結果が得られなかった
・シグナルがみられず、標識されているかも分からない
・標識はされているが、シグナルがみられない...など

![]() |
|
|
![]() |
![]() |
|
|
![]() |
![]() |
|
抗体量 10 µgの場合 |
---|
|
抗体量 50-200 µgの場合 |
---|
|
|
-NH2 | -SH |
---|---|---|
原理 | ![]() |
![]() |
操作方法 | ![]() |
![]() |
メリット |
〇 還元操作が不要 〇 標識部位が多い |
〇 標識によって抗原認識部位が阻害されにくい |
デメリット | × 抗原認識部位を阻害する可能性がある |
× -NH2に比べ感度が低い × 実験操作が多い |
こんな方へ おすすめ |
・ 初めての抗体標識をする方 ・ 簡単な操作で標識したい方 |
・ -NH2ではうまく標識できなかった方 ・ 蛍光タンパクや酵素等分子量の大きいものを標識したい方 |
対象製品 |
|
![]() |
|
![]() |
|
使用キット:Biotin Labeling Kit-SH
突発性肺繊維症(IPF)症例における軌道上皮細胞の二重免疫蛍光染色 (画像提供:熊本大学医学部教授赤池孝章先生) |
Biotin Labeling Kit-SH を用いてAnti-Nitroguanosine monoclonal 抗体(Code: ABO2)のビオチン標識抗体を作成し、 8ーニトログアニンの生成を検出した(Fluorescein標識ストレブトアビジン蛍光染色)。 |
使用キット:Biotin Labeling Kit-NH2
competitive-inhibition
抗X抗体をBiotin Labeling Kit-NH2によりビオチン標識後、streptavidin-APCを用いてフローサイトメトリーで解析した。
(A) 未標識抗×抗体を反応後、ビオチン化抗×抗体を反応 |
(B) ビオチン化抗×抗体のみ反応 |
抗原を未標識抗×抗体でブロックした(A)では、抗体の競合阻害によりビオチン化抗x抗体の反応は見られず、 ビオチン化抗x抗体のみを反応させた(B) において陽性分画が見られた。 自製の標識抗体においても非特異的反応の少ない十分な検出反応を行うことが可能である。
(データ提供:北海道大学遺伝子病制御研究所黒滝大翼先生、今重之先生)
使用キット:Biotin Labeling Kit-NH2 | 使用キット:Biotin Labeling Kit-SH |
く実験例1 > サンドイッチELISA(NH2タイプ使用) Anti-CAT lgG 100 µgをBiotin Labeling Kit-NH2(BLK-NH2)を用いてビオチン標識し、サンドイツチELISAにより Chloramphenicol Acetyltransferase(CAT)を検出した。本キットを用いて作製したビオチン標識抗体を用いた場合、他社ビオチン化キットに比べ、1.5 -2倍高感度であった。
Biotin Labeling Kit-NH2および他社品キツトを用いて作製したビオチン標識Anti-CAT(Chloramphenicol Acetyltransferase)抗体を用いたELISA |
<実験例2> サンドイッチELISA(SHタイプ使用) Anti-CAT lgG 100 µgをBiotin Labeling Kit-SH(BLK-SH)を用いてビオチン標識し、サンドイッチELISAによりChloramphenicol Acetyltransferase(CAT)を検出した。本キッ トを用いて作製したビオチン標識抗体を用いた場合、他社 ビオチン化キットに比べ、10-12倍高感度であった。
Biotin Labeling Kit-SHおよび他社品キットを用いて作製したビオチン標言哉Anti-CAT(Chloramphenicol Acetyltransferase)抗体を用いたELISA |
ビオチン | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 解析方法 |
ビオチン | 10 μg 抗体 | -NH2 | Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit ※ | |
50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Biotin Labeling Kit -NH2 ※ | ||
-SH | Biotin Labeling Kit -SH | |||
1 mg 抗体 | -NH2 | Biotin Labeling Kit - NH2 (for 1mg) | ||
1-5 mg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Biotinylation Kit (Sulfo-OSu) ※ |
![]() |
|
![]() |
|
使用キット:Ab-10 Rapid Fluorescein Labeling Kit , Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit
Hela細胞のアクチン及びミトコンドリアの免疫染色画像 |
使用キット:ICG Labeling Kit - NH2
competitive-inhibition
抗X抗体をBiotin Labeling Kit-NH2によりビオチン標識後、streptavidin-APCを用いてフローサイトメトリーで解析した。
尾静注によりICGラベル抗体50 μg投与(投与48時間後に測定) in vivo光イメージング装置(Claivivo OPT:島津製作所)を用いて蛍光観察 |
使用キット:Ab-10 Rapid Fluorescein Labeling Kit
抗CD44抗体(10 μg)をAb-10 Rapid Fluorescein Labeling Kitを用いてFluorescein標識後HL60細胞を免疫染色した。
Fluorescein標識抗CD44抗体を用いた |
<フィルター>
Ex : 488 nm
Em: 515-545 nm
蛍光色素 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 解析方法 |
Fluorescein | 10 μg 抗体 | -NH2 | ||
50-200 μg 抗体・タンパク質 |
-NH2 |
|||
HiLyte Fluor™ | 10 μg 抗体 |
-NH2 |
Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 555 / 647 Labeling Kit -NH2 (数字がリンク) ※ | |
50-200 μg 抗体・タンパク質 |
-NH2 |
HiLyte Fluor™ 555 / 647 Labeling Kit -NH2 (数字がリンク) ※ |
||
ICG | 50-200 μg 抗体・タンパク質 |
-NH2 |
蛍光タンパク質 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 解析方法 |
R-Phycoerythrin |
10 μg 抗体 |
-NH2 |
Ab-10 Rapid R-Phycoerythrin Labeling Kit ※ |
|
50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | R-Phycoerythrin Labeling Kit-NH2 ※ | ||
-SH |
R-Phycoerythrin Labeling Kit-SH | |||
Allophycocyanin | 50-200 μg 抗体・タンパク質 |
-NH2 |
Allophycocyanin Labeling Kit-NH2 ※ | |
-SH | Allophycocyanin Labeling Kit-SH |
![]() |
|
使用キット: Peroxidase Labeling Kit -NH2 , -SH | 使用キット:Alkaline Phosphatase Labeling Kit -NH2 , -SH |
ELISAプレートに固定化したBiotin標識BSAを、各種方法でHRP標識した抗ビオチン抗体を用い て検出比較した。
Peroxidase Labeling Kit-NH2, Peroxidase Labeling Kit-SH および他社品Kitを用いて作製した HAP標識抗ビオチン抗体を用いたELISA |
ELISAプレートに固定化したビオチン標識BSAを、各種方法で標識した抗ビオチン抗体を用いて検出感度を比較した。
Alkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2, Alkaline Phosphatase Labeling Kit-SHおよび他社品Kitを用いて作製した ALP標識抗ビオチン抗体を用いたELISA |
使用キット:Alkaline phosphatase Labeling Kit |
|
リン酸化チロシンBSAをSDS-PAGEで得移動した後、ニトロセルロース膜に転写し、PLK-NH2で作成したHRP標識リン酸化チロシン抗体を用いて検出した。 リン酸化チロシンBSAのウエスタンブロット (それぞれTMB発色) |
抗原タンパク質をSDS-PAGEで泳動した後、ニトロセルロース膜に転写し、Alkaline phosphatase Labeling Kit-NH₂で作製したALP標識抗体を用いて検出した。 |
酵素 | サンプル量・種類 | 標識対象 | 品名 | 解析方法 |
Peroxidase |
10 μg 抗体 |
-NH2 |
Ab-10 Rapid Peroxidase Labeling Kit ※ |
|
50-200 μg 抗体・タンパク質 | -NH2 | Peroxidase Labeling Kit-NH2 ※ | ||
-SH |
Peroxidase Labeling Kit-SH | |||
1 mg 抗体 | -NH2 | Peroxidase Labeling Kit - NH2 (for 1mg) | ||
Alkaline Phosphatase |
50-200 μg 抗体・タンパク質 |
-NH2 |
Alkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2 ※ | |
-SH | Alkaline Phosphatase Labeling Kit-SH |