これからはじめる 細胞増殖／細胞毒性測定

細胞増殖/毒性の測定には、細胞数のカウント、[3H] チミジン取り込み法、 MTT法、WST法、遊離LDH活性測定法など様々な測定法が利用されています。本項では、実験に合った測定法を選択頂くための基礎情報として、細胞増殖/毒性測定の各種指標を大きく3つに分けて解説します。下記内容は「細胞増殖/毒性試験　試薬の選び方セミナー」の動画（ページ下部）でもご確認いただけます。

「細胞増殖/毒性の指標」の項で解説しましたが、測定法には細胞増殖や毒性を直接的に解析する「細胞増殖能力」と「細胞毒性」に対し、間接的に細胞数や毒性を解析する「細胞生存能力」があります。これらの中から特に汎用されている「細胞生存能力」と「細胞毒性」の測定試薬を一覧でご紹介します。

細胞生存能力測定用試薬の比較

MTT法やWST※法は、還元発色試薬と生細胞中の脱水素酵素活性を利用して吸光度測定により細胞数を計測する方法で、測定の手軽さ、安全性、再現性などの点から細胞増殖試験や細胞毒性試験など幅広く利用されています。その他、細胞生存能力測定用試薬の比較をまとめています。

※各測定法の測定原理は「細胞増殖/毒性試験　試薬の選び方セミナー」の動画で解説しています。

＜細胞毒性測定用試薬の比較＞

Cytotoxicity LDH Assay Kit-WSTは、細胞膜損傷により細胞外に漏れ出した酵素（Lactate Dehydrogenase：LDH）を指標に細胞毒性を測定する方法です。他試薬と比較して多検体処理が可能であること、吸光度法かつ操作が簡便であることから細胞毒性試験の中でも汎用されている測定法です。その他、細胞毒性測定用試薬の比較をまとめています。

※各測定法の測定原理は「細胞増殖/毒性試験　試薬の選び方セミナー」の動画で解説しています。

細胞毒性を測定する際、WST法やMTT法による生細胞の脱水素酵素活性を指標とした測定に併せて、遊離LDH活性測定による細胞膜損傷を指標とした死細胞の測定が行われています。これは例えば、WST法を用いた試験だと、一見、細胞毒性が認められる結果が得られた場合、細胞数が減少しているのか？もしくは細胞の脱水素酵素活性が低下しているのか？の違いが分かりません。そこで、遊離LDH活性など別の指標を同じ実験で併用することにより、信頼性の高い結果を得ることができます。