細胞増殖/細胞毒性測定用試薬の選択ガイド

細胞増殖/細胞毒性アッセイキット:Cell Counting Kit-8 お得なキャンペーン実施中!

 


MTT法やWST法は、還元発色試薬と生細胞中の脱水素酵素活性を利用して、吸光度測定により細胞数を計測する方法で、測定の手軽さ、安全性、再現性などの点から細胞増殖試験や細胞毒性試験など幅広く利用されています。
また、細胞毒性を測定する際、MTT法やWST法など脱水素酵素活性を細胞毒性の指標とした測定と合わせて、細胞膜損傷を指標とした遊離LDH活性測定も行われています。これは、例えば、WST法を用いた毒性試験で、一見、細胞毒性が認められる結果が得られた場合でも、細胞数が減少しているのか、もしくは細胞の脱水素酵素活性が低下しているのか、の違いが分かりません。そこで、別の指標として遊離LDH活性等を利用した測定が併用されています。
各々の細胞増殖および毒性試験法の特徴と比較を下の表に示しました。

※ WST法の色素(WST)群は、㈱同仁化学研究所が開発しました。

そのWST-8を用いたCell Counting Kit-8は、細胞増殖・毒性試験のスタンダードな製品として世界中で利用されています。

 

製品名 Cell Counting Kit-8  Cell Counting Kit-F MTT Cytotoxicity LDH
Assay Kit-WST 
用途 細胞増殖・毒性試験 細胞増殖・毒性試験 細胞増殖・毒性試験 細胞毒性
・細胞傷害性試験
検出方法 吸光度 蛍光 吸光度 吸光度
色素名 WST-8 Calcein-AM MTT WST
測定原理 細胞全体の酵素活性 細胞内エステラーゼ活性 ミトコンドリアの酵素活性 遊離LDH活性
特長

・操作が簡便
・細胞毒性が低い
・試薬の安定性が高い
・論文報告例が多数
 ⇒細胞別の報告例はコチラ

・吸光度法より高感度
・染色時間が短い
・培地交換が必要

・低コスト
・色素の溶解操作が必要
・使用前に試薬調製が必要

・死細胞を直接測定できる
・試薬の安定性が高い
・放射性同位体を使用しない
・血清濃度に注意が必要

製品コード CK04 CK06 M009 CK12

※ Cell Counting Kit-8Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST をセットにした、お得な Viability/Cytotoxicity Multiplex Assay Kit

 

 

下の図では各測定方法の対象となる細胞内の酵素を示した。各測定方法ともマイクロプレートリーダーを用いて簡便に測定することができる。
一方で、使用する試薬に応じて、指標とされる酵素活性が違うため、得られる結果が異なる点に注意が必要となる。ここで示した測定方法の他にも、トリパンブルー法、チミジン取込み法、BrdU取込み法、細胞内ATP測定法などがある。

 

 

 

あわせて読みたいプロトコル集!

細胞増殖測定細胞染色プロトコル

上記に示した細胞増殖測定試薬(Cell Counting Kit, Cell Counting Kit-8 他)と細胞染色試薬(-Cellstain-)を用いた測定方法を、図解と写真で基礎からわかりやすく解説したプロトコルです。
また、操作上の注意点やコツの他、弊社へのお問合せを元にした「よくある質問」や「トラブルシューティング」も掲載しています。
一緒にご一読いただき、実験にお役立てください。

製品分類一覧

分類一覧から探す