老化CAFが乳がんの進行と免疫機能に与える影響

　がん細胞の周りに混在する細胞や成分が作り出す腫瘍微小環境は、腫瘍形成に影響を及ぼすとされている。本論文では、腫瘍微小環境の構成要素であるがん関連線維芽細胞（cancer associated fibroblast：CAF）に着目し、老化したがん関連線維芽細胞（老化CAF）が腫瘍形成にもたらす影響を明らかにした。筆者らは、老化CAFが乳がん組織に存在し、CAFの中でも筋線維芽細胞型myCAFというタイプに限定して存在することを確認した。特に、p16を発現する老化CAFは乳がん組織内のmyCAFに多く存在していた。さらに、老化CAFが異常な細胞を排除するナチュラルキラー（NK）細胞の働きを弱める仕組みを解明した。老化CAFはNK細胞を阻害する細胞外マトリックス（ECM）を産生し腫瘍形成を促していた。老化CAFの除去が腫瘍の進行を抑えている結果から、老化CAFを標的とした治療が乳がん治療に役立つ可能性を示した。

Senescent CAFs mediate immunosuppression and drive breast cancer progression
論文へのアクセスはこちら:  Ye, J. et al., Cancer Discov., (2024)

注目ポイント

・老化したがん関連線維芽細胞（老化CAF）は、ナチュラルキラー（NK）細胞の活性を抑制する細胞外マトリックス（ECM）を産生し、腫瘍の進行を促進する

・老化CAFの除去は腫瘍の進行を遅延させることから、老化CAFを標的とした治療が今後の乳がん治療に寄与する可能性を示した

・老化CAFがmyCAFに限定して存在していることから、細胞老化に特定のCAFやプログラムが関与している可能性がある

老化誘導によるA549細胞の代謝シフト

Doxorubicin誘導老化細胞を用いた酸化ストレス関連マーカーとの多重染色解析（フローサイトメトリー)

Doxorubicin処理により老化誘導したA549細胞(DOX)と通常細胞（CTRL）を用いて、老化細胞の酸化ストレス関連マーカーの変化をフローサイトメトリーで多重染色解析を行った。老化マーカーとしてSA-β-GalをCellular Senescence Detection Kit - SPiDER Blue, 酸化ストレスマーカーとしてtotal ROSの検出をROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA-, DNAダメージマーカーとしてγH2AXをDNA Damage Detection Kit - γH2AX – Redで検出した。
その結果、 SA-β-Gal陽性の老化細胞において、total ROS, γH2AXが増大する結果が得られた。


【検出条件】
使用装置：SONY SA3800
　 SPiDER Blue: PacificBlue 　
    ROS Assay Kit: FITC
    γH2AX - Red: Cy3

＜実験手順>
 *事前に、通常培地で培養した細胞 (CTRL) と、DOX 処理 (0.2 μM DOX 3 days → 通常培地 3 days) した細胞 (DOX) を準備
 実験の詳細については、 SPiDER Blueの製品ページをご確認ください。