これからはじめる 細胞内代謝

 

がん細胞は、活発な細胞増殖を維持するため迅速に大量の栄養素を取り込み、代謝することによってタンパク質や核酸の合成、ATPなどのエネルギー産生を行っています。また、細胞にとって不利な環境（低酸素や低栄養）下であっても、がん細胞は代謝系を変化させて生存しています。そのため、近年、がん細胞の代謝系を解明する研究が活発に進められています。

 

　

特徴的な代謝として、がん細胞はミトコンドリアの酸化的リン酸化よりも非効率な解糖系を用いてATPを産生します（ワールブルグ効果）。そのため、がん細胞は糖を大量に取り込みます。また解糖系の亢進によって乳酸を大量に産生します。解糖系を用いたATP産生には酸素は必要ないため、低酸素下でもがん細胞は増殖することができます。一方、がん細胞のミトコンドリアは、アミノ酸や脂肪を用いてNADH産生を行います。がん細胞のミトコンドリア内NADHはATP産生以外に主にレドックス制御に利用されている、と考えられています。がん細胞のミトコンドリアは異常な機能を有しており、その結果としてミトコンドリア膜電位の上昇（過分極）および過剰な活性酸素の産生を引き起こします。そのため、多くのグルタチオンを産生してレドックスバランスを維持しています。グルタミンやシステインはグルタチオン産生に必須な栄養素となるため、がん細胞ではこれらアミノ酸を過剰に取り込んでいます。さらに、還元型グルタチオンを維持するためにはNADPHが必要となるため、解糖系から続くペントースリン酸経路やミトコンドリアのNADHを利用して高いNADPH濃度を維持しています。
また、最近の研究では、がん細胞は解糖系が抑制されてもミトコンドリア機能を亢進させることでエネルギー代謝を酸化的リン酸化にシフトさせ、生存に必要なATPを産生することが報告されています。

（注意）上述の内容は、がん細胞の一般的な代謝特性を示すものであり、がん細胞の種類や環境によって異なります。

 

参考文献

下記文献は、がん細胞の代謝研究に関する総説となります。ご研究をはじめる際の参考文献としてご参照ください。

キーワード	文献
解糖系	M. G. Vander Heiden, L. C. Cantley, and C. B. Thompson, “Understanding the Warburg Effect: The Metabolic Requirements of Cell Proliferation”, Science, 2009, 324, 1029.
アミノ酸代謝、ROS	P. Koppula, Y. Zhang, and B. Gan, “Amino Acid Transporter SLC7A11/xCT at the Crossroads of Regulating Redox Homeostasis and Nutrient Dependency of Cancer”, Cancer Commun., 2018, 38, 12.
アミノ酸代謝	E. L. Lieu, T. Nguyen, S. Rhyne, and J. Kim, “Amino Acids in Cancer”, Exp. Mol. Med., 2020, 52, 15
ミトコンドリア、ROS、NADPH	F. Ciccarese and V. Ciminale, “Escaping Death: Mitochondrial Redox Homeostasis in Cancer Cells”,  Front. Oncol. 2017,  7, 117.
NADH	A. Chiarugi, C. Dolle, R. Felici, and M. Ziegler, “The NAD Metabolome-A Key Determinant of Cancer Cell Biology”, Nat. Rev. Cancer, 2012, 12, 741. (有料)

 

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がん研究における標的ごと学術情報

下記のタイトルをクリックで該当項目にジャンプします

• グルコース代謝阻害と抗がん作用
• アミノ酸代謝阻害と抗がん作用
• 脂肪酸代謝阻害と抗がん作用
• がん免疫と代謝

 

グルコース代謝阻害と抗がん作用

がん細胞は主に解糖系を用いてATP産生を行うため、解糖系をターゲットとした抗がん剤の開発が古くから進められています。未だ有効な抗がん剤の開発には至っていませんが、現在でも解糖系はがん細胞の主要な薬剤ターゲットです。そのため解糖系は、がん細胞の代謝を理解する上で最も重要な経路です。 創薬において解糖系の標的タンパク質として、グルコーストランスポーター（GLUT）が挙げられます。がん細胞はグルコーストランスポーターを介して糖を大量に取り込んでいるため、グルコーストランスポーターを直接的に阻害することによって解糖系を抑制することが可能です。またグルコース飢餓、解糖系を担う酵素群（ヘキソキナーゼ: HK、乳酸脱水素酵素：LDHなど）の活性阻害や解糖系の最終産物である乳酸の細胞外への流出抑制も有効な手段です。

 

各阻害剤による細胞内代謝の変化・参考文献　　※表中の指標にあるリンクをクリックすると測定キット・試薬ページが開きます。

 

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アミノ酸代謝阻害と抗がん作用

増殖が活発ながん細胞において、アミノ酸はタンパク質や核酸の合成に必須な栄養素です。また、がん細胞では解糖系からのアセチルCoAの供給が低下するため、TCAサイクルの栄養源としてアミノ酸を積極的に利用しています。そのため、がん細胞ではアミノ酸トランスポーターの発現量を増やして、多くのアミノ酸を取り込んでいることが明らかとなっています。特にグルタミンは、グルタチオンの原料、およびTCAサイクルに必須なα-ケトグルタル酸の供給源であり、グルタミンの取り込みや代謝（グルタミノリシス）をターゲットとした薬剤開発が注目されています。また、多くの必須アミノ酸の取り込みに関与するアミノ酸トランスポーターLAT（L-type amino acid transporter)が多くのがん細胞で過剰発現していることがわかり、新しい創薬ターゲットとして期待されています。 　レドックス制御に必要なシステインは、他のアミノ酸とは異なり、主にシスチントランスポーターであるxCTによって細胞内に取り込まれています。がん細胞では活性酸素が大量に発生しているため、抗酸化物質であるグルタチオン産生を高めてレドックスバランスを維持しています。そのため、グルタチオン産生に関与する経路を阻害することで細胞内レドックスバランスを変化させ、フェロトーシスなどの細胞死を誘導することが可能です。またグルタチオンは薬剤耐性にも寄与しているため、グルタチオン産生に関与する経路は薬剤開発の主要なターゲットとなっています。特に最近では抗炎症薬として古くから用いられているスルファサラジンやがんの分子標的治療薬であるソラフェニブがxCTを阻害することが明らかとなり、 xCT阻害によるフェロトーシスを介した抗がん作用に注目が集まっています。

 

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脂肪酸代謝阻害と抗がん作用

細胞増殖が活発ながん細胞では、当然ながら多くの脂質を必要とします。そのため、細胞内における脂肪酸合成や細胞外からの脂肪酸取り込みが活発です。そのため、多くのがん細胞では脂肪滴の蓄積が亢進しています。がん細胞に対する治療標的は主に脂肪酸産生に関わる経路であり、多くの阻害剤が開発されています。また一方でがん細胞は、解糖系による非効率なエネルギー産生を補うため、脂肪酸のβ酸化を利用して効率的なエネルギー産生を行っています。そのため、脂肪酸のβ酸化をターゲットとした薬剤開発も行われています。

 

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がん免疫と代謝

がん細胞を排除するための免疫システムの中心的な役割を果たしているのがT細胞です。近年、T細胞の分化や活性化などの機能制御にも代謝が関与していることが明らかとなり、がん免疫における代謝研究が活発になっています。がん細胞は大量の栄養素を取り込み増殖活性を維持していますが、活性化T細胞もがん細胞を排除するため大量の栄養素、特にグルコースを必要としています。そのため、活性化T細胞とがん細胞は腫瘍局所で“グルコースの奪い合い”という戦いを繰り広げています。 　免疫チェックポイント分子である活性化T細胞表面上のPD-1に対し、がん細胞はPD-L1を発現してT細胞の活性を抑制していることはよく知られていますが、この相互作用がT細胞のグルコース取り込みを抑制していることが近年の研究によって明らかとなっています。がん細胞はこのように免疫系から回避するために免疫細胞の代謝をも制御しており、がん免疫の研究分野ではがん細胞だけでなく、免疫細胞の代謝を理解することが重要となっています。

 

参考文献

1)	Z. Yin, L. Bai, W. Li, T. Zheng, H. Tian, and J. Cui, “Targeting T cell metabolism in the tumor microenvironment: an anti-cancer therapeutic stratety”, J. Exp. Clin. Cancer Res. 2019, 38, 403.
2)	L. Almeida, M. Lochner, L. Berod, and T. Sparwasser, “Metabolic pathways in T cell activation and linear differentiation”, Semin. Immunol. 2016, 28(5), 514.
3)	A. Kumar and K. Chamoto, “Immune metabolism in PD-1 blockage-based cancer immunotherapy”, Int. Immunol., 2020 Jul 5;dxaa046.
4)	D. G. Franchina, F. He, and D. Brenner, “Survival of the fittest: Cancer challenges T cell metabolism”, Cancer Lett., 2018, 412, 216.
5)	N. Patsoukis, K. Bardhan, P. Chatterjee, D. Sari, B. Liu, L. N. Bell, E. D. Karoly, G. J. Freeman, V. Petkova, P. Seth, L. Li, and V. A. Boussiotis, “PD-1 alters T-cell metabolic reprogramming by inhibiting glycolysis and promoting lipolysis and fatty acid oxidation”, Nat. Commun., 2015, 6, 6692.

 

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高血糖状態によるポリオール代謝の亢進

高血糖状態では、細胞内Glucose濃度が上昇しポリオール経路の代謝が亢進します。これによりNADPHが過剰に消費され、還元型グルタチオン(GSH)が減少します。 この結果、酸化ストレスが増加し細胞損傷が促進します 。

 

参考文献

M. Brownlee, “The pathobiology of diabetic complications: a unifying mechanism”, DIABETES, 2005, 54, 1615.

 

関連製品

老化関連疾患と乳酸、NAD⁺の関係

近年、NAD+と老化との関係性が注目を集めています。マウスの個体老化モデルでは肝臓等でNAD+量の減少が認められ1)、NAD+合成酵素の阻害は老化様の細胞機能低下を惹起することが報告されています2)。また、NAD+量の減少はミトコンドリア機能低下を招き3)、一方でミトコンドリア機能の低下はNAD+量の減少、ひいては老化様の細胞機能低下を招くことが示唆されています4) 。 ミトコンドリア機能低下により増加した乳酸は老化関連疾患であるがんや糖尿病の病態進展とも密接に関わっており5), 6)、老化との関係を紐解くのに、NAD+および乳酸の変化を解析することが重要視され始めています。   老化細胞検出：選択ガイドと老化マップ 学術情報を交え関連の研究分野を概説

 

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DNA損傷により老化した細胞

 

老化細胞ではミトコンドリア機能低下に伴い、嫌気的解糖系によるATP産生を主とするため、乳酸産生量が増加しています⁷⁾。
老化によるミトコンドリア機能低下の要因の一つとして、DNA損傷が挙げられます。DNAへのダメージが蓄積するとDNA修復機構が活性化し、NAD⁺消費量が増加します。
NAD⁺量の減少はミトコンドリア機能維持に重要な因子であるSIRT1活性を下げ、ミトコンドリア機能低下（電子伝達系阻害→ATP産生・NAD⁺量の低下）を招きます^{3), 8)}。

 

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グルタミン代謝と細胞老化

腫瘍抑制メニンは、mTORC1 依存性代謝活性化を標的とすることにより、エフェクター CD8T 細胞機能障害を防止する⁹⁾

メニンは、老化や疲労などのT 細胞機能障害の予防に重要な役割を果たす腫瘍抑制因子である。メニンが欠乏すると、mTORC1 が活性化され、解糖系やグルタミン分解を介した酸化的リン酸化が亢進、CD8T 細胞の機能障害を引き起こす。また、グルタミン代謝中間産物である α-Ketoglutarate は、mTORC1の活性化を維持、細胞老化の促進に寄与する (SA-β-gal 活性の亢進) 。グルタミン－α-Ketoglutarate 経路が、CD8T 細胞機能障害の誘導に重要な役割を果たし、メニンがT細胞の老化を阻害する可能性が示唆されている。

 

参考文献

1)	J. Yoshino, K. F. Mills, M. J. Yoon and S. Imai, “Nicotinamide mononucleotide, a key NAD+ intermediate, treats the pathophysiology of diet- and age-induced diabetes in mice”, Cell Metab., 2011, 14(4), 528.
2)	L. R. Stein and S. Imai, “Specific ablation of Nampt in adult neural stem cells recapitulates their functional defects during aging”, EMBO J., 2014, 33(12), 1321.
3)	J. Wu, Z. Jin, H. Zheng and L. Yan, “Sources and implications of NADH/NAD+ redox imbalance in diabetes and its complications”, Diabetes Metab. Syndr. Obes., 2016, 9, 145.
4)	A. Bratic and N. Larsson, “The role of mitochondria in aging”, J Clin Invest. 2013, 123(3), 951.
5)	I. San-Millancorresponding and G. A. Brooks, “Reexamining cancer metabolism: lactate production for carcinogenesis could be the purpose and explanation of the Warburg Effect”, Carcinogenesis, 2017, 38(2), 119.
6)	Y. Wu, Y. Dong, M. Atefi, Y. Liu, Y. Elshimali, and J. V. Vadgama, “Lactate, a Neglected Factor for Diabetes and Cancer Interaction”, Mediators Inflamm., 2016. DOI: 10.1155/2016/6456018
7)	Z. Feng, R. W. Hanson, N. A. Berger and A. Trubitsyn, “Reprogramming of energy metabolism as a driver of aging”, Oncotarget., 2016, 7(13), 15410.
8)	S. Imai and L. Guarente, “NAD+ and sirtuins in aging and disease”, Trends in Cell Biology, 2014, 24(8), 464.
9)	J. Suzuki, et al, “The tumor suppressor menin prevents effector CD8 T-cell dysfunction by targeting mTORC1-dependent metabolic activation.”, Commun  Nat Commun, 2018, 9(1), 3296.

 

関連製品

NASH（非アルコール性脂肪肝炎）

非アルコール性肝疾患（NAFLD）は飲酒歴にかかわらず、高齢者に好発する肝臓の病態変化であり、脂肪肝（Steatosis）から非アルコール性脂肪肝炎（NASH）を経て、線維化を伴う肝硬変（Cirrhosis）・肝癌（HCC）へと進行する包括的な疾患概念です¹⁾。近年、細胞老化とそれに伴うミトコンドリア機能異常がNAFLD/NASHの進展に大きく寄与していることが報告され注目を集めております^2,3,4,5)。NAFLD/NASHのリスクファクターである肥満状態では、脂質の沈着が増加し活性酸素種（ROS）や炎症性サイトカインの産生が亢進し、細胞老化が惹起されます²⁾。細胞老化に伴うNAD⁺量の低下によりミトコンドリア機能は低下³⁾し、ミトコンドリア機能の低下はさらなるNAD⁺量の低下を招き老化様の細胞機能変化を増長します⁴⁾。一方で肝臓特異的に細胞老化を誘導することで脂質沈着の増加、線維化の促進が認められたこと⁵⁾から、NAFLD/NASHの進展過程では細胞老化やミトコンドリア機能異常、それに付随する代謝変化が複雑に平衡して炎症・線維性の病態を形成していることが明らかとなっております。今後この複雑な平衡関係とNAFLD/NASHとの関係をより詳細に解析していくことが新たな治療方法確立への一助となると期待されています。

 

 

各NAFLD/NASHモデルにおける報告例　　※表中の指標にあるリンクをクリックすると測定キット・試薬ページが開きます。

NAFLD/NASHモデル	細胞機能、代謝変化等	文献
老化、肥満、糖尿病モデルマウス	肝細胞老化（SA-β-Gal↑、p21↑）⇒ 老化細胞の除去により病態改善	Nat. Commun., 2016, 8, 15691.
高脂肪食＋高コレステロール食処理マウス	肝臓でのミトコンドリア機能異常（ATP↓、膜電位↓、過酸化水素産生量↑）	Redox Biol., 2018, 15, 86-96
高脂肪食処理マウス	肝臓でのミトコンドリア機能異常（ATP↓、NAD↓）、PARP↑ ⇒ PARP発現抑制によりミトコンドリア機能改善及び病態改善	J. Hepatol., 2017, 66, 132–141
肝星細胞線維化モデル	α-ketoglutarate↑、type I collagen↑ → α-ketoglutarateの添加で線維化改善	Biosci. Rep., 2020, 40, BSR20193385
高脂肪食処理マウス	肝臓での脂質沈着↑、肝機能↓ → α-ketoglutarateの添加で病態改善	Liver Res., 2020, 4, 94e10095

実験例

・ハイコンテントイメージングによる、薬物誘発性脂質症の肝毒性試験

・NASH誘導マウスの肝臓組織における代謝の変化

 

参考文献

1)	T. Hardy, F. Oakley, Q. M. Anstee and C. P. Day, “Nonalcoholic fatty liver disease: pathogenesis and disease spectrum”, Annu. Rev. Pathol., 2016, 11, 451-496.
2)	M. J. Schafer, et al, “Exercise Prevents Diet-Induced Cellular Senescence in Adipose Tissue”, Diabetes, 2016, 65, 1606-1615.
3)	J. Wu, Z. Jin, H. Zheng and L. Yan, “Sources and implications of NADH/NAD+ redox imbalance in diabetes and its complications”, Diabetes Metab. Syndr. Obes., 2016, 9, 145.
4)	A. Bratic and N. Larsson, “The role of mitochondria in aging”, J Clin Invest. 2013, 123(3), 951.
5)	M. Ogrodnik, et al, “Cellular senescence drives age-dependent hepatic steatosis”, Nat. Commun., 2016, 8, 15691.

グルタミン代謝とオートファジー

BAG3によるグルタミナーゼの安定化を介したオートファジーとグルタミノリシスの促進

BAG3は、アポトーシスや細胞分化、マクロオートファジー等の様々な細胞機能の制御に関与するタンパク質である。BAG3 が過剰発現した細胞では、グルタミナーゼ (GLS)のスクシニル化が促進されることにより、ユビキチン化とそれに続くプロテアソーム分解が防がれ、GLS タンパク質が安定化する。GLSが安定化することで、グルタミン分解が促進されるため、グルタミン消費が亢進し、細胞内グルタミン酸およびグルタミン代謝中間産物であるα Ketoglutarate が増加する。グルタミン分解の促進により生じる培養液中のアンモニアは、オートファジーの活性化に寄与する。グルタミノリシスが亢進しているがん細胞では、このBAG3 ががん治療の標的になる可能性が示唆されている。

※ BAG3：ヒトの組織全般に普遍的任分布するタンパク質であり、種々のストレスにより誘導される。アポトーシス、細胞分化、マクロオートファジー等の様々な細胞機能の制御に関与する、さらに、がんや加齢に伴う神経変性疾患に関連する、近年注目されているタンパク質。

参考文献

S. Zhao, et al, “BAG3 promotes autophagy and glutaminolysis via stabilizing glutaminase”, Cell Death & Disease, 2019, 284(10).